- Što je koronavirus i kako se infekcija odvija?
- Testovi na koronavirus - koji laboratorijski test trebam odabrati?
- Testovi na koronavirus - molekularno testiranje
- Testovi na koronavirus - Imunološki test
- Testovi na koronavirus - Brzi dijagnostički testovi
- Testovi na koronavirus - kako izgleda zbirka istraživačkog materijala?
- Testovi na koronavirus - tko bi trebao napraviti test?
- Testovi na koronavirus - kako protumačiti rezultate imunoloških testova?
- Testovi na koronavirus - kako protumačiti rezultate molekularnih testova?
- Testovi na koronavirus - gdje se to može učiniti?
Pomozite razvoju web mjesta, dijelite članak s prijateljima!
Tijekom pandemije koronavirusa SARS-CoV-2, rana i pouzdana dijagnoza ključna je za kontrolu širenja infekcije. U tu svrhu koriste se dijagnostički testovi, uglavnom molekularni i imunološki testovi. Istodobno, brzi testovi s kasetama za koronavirus sve su dostupniji na tržištu. Koje testove na koronavirus trebam odabrati i jesu li svi pouzdani?
Testovi na koronavirusneophodni su za utvrđivanje infekcije koronavirusom SARS-CoV-2. Simptomi infekcije nisu jasni, a ponekad se i ne pojavljuju. Stoga se za dijagnostiku koriste testovi – uglavnom molekularni i imunološki, iako postoje i kasetni testovi.
Što je koronavirus i kako se infekcija odvija?
Teški akutni respiratorni sindrom koronavirus 2 (SARS-CoV-2) novi je virus koji uzrokuje bolest COVID-19. SARS-CoV-2 pripada obitelji koronavirusa, koja također uključuje viruse SARS-CoV i MERS-CoV. Koronavirus SARS-CoV-2 identificiran je početkom siječnja 2022. kao uzrok epidemije upale pluća u Wuhanu u Kini. Nakon što su tisuće ljudi u Kini zaražene i ubijene, koronavirus se proširio svijetom uzrokujući pandemiju.
Prijenos koronavirusa s čovjeka na čovjeka događa se kapljicama u bliskom kontaktu i preko površina kontaminiranih izlučevinama bolesne osobe. Stoga je higijena ruku ključna u sprječavanju infekcije koronavirusom.
Glavni simptomi infekcije su:
- groznica iznad 38 ° C,
- kašalj,
- umor,
- nedostatak daha,
- i grlobolja,
- glavobolja,
- konjunktivitis,
- gubitak okusa i mirisa
- i gastrointestinalni problemi.
Simptomi se pojavljuju unutar 14 dana od izlaganja koronavirusu. Međutim, u većini slučajeva (97,5%), počinju u roku od 11 dana.
U ovom trenutku, međutim, treba naglasiti da se simptomi infekcije koronavirusom razlikuju od osobe do osobe, u rasponu od asimptomatske infekcije do teškog zatajenja dišnog sustava i tzv. citokinska oluja. Potonji su posebno osjetljivi na osobe iz visoko rizičnih skupina, poput starijih ili oboljelihkoegzistirajući (dijabetes i kardiovaskularne bolesti).
Talijanska kohortna studija koju je dr. Lavezzo i suradnici proveli u gradu Vó Euganeo otkrili su da 50-75% ljudi koji su pozitivni na bris grla ostaju asimptomatski, dok drugi razvijaju blage simptome slične gripi. Nasuprot tome, samo 10% svih simptomatskih pacijenata ima teže manifestacije infekcije.
Testovi na koronavirus - koji laboratorijski test trebam odabrati?
Za utvrđivanje infekcije koronavirusom SARS-CoV-2 potrebno je obaviti specijalizirane laboratorijske pretrage jer to nije moguće samo na temelju kliničkih simptoma. Trenutno se koriste dvije vrste laboratorijskih testova na koronavirus:
- molekularni (genetski) testovi
- imunološki testovi (serološki ili antigenski)
Imajte na umu da se dijagnostička vrijednost gornjih testova može razlikovati.
Testovi na koronavirus - Sažetak testova na koronavirus [TABLICA]
| Molekularni (genetski) testovi | Imunološki (serološki) testovi | Testovi uloška | |
| Metoda istraživanja | RT-PCR u stvarnom vremenu | imunoenzimske ili imunokemijske metode | imunokromatografske metode |
| Testni materijal | bris grla ili nazofarinksa | venska krv | kapilarna krv uzeta iz prsta |
| Otkrivanje što? | genetski materijal virusa - RNA | IgM, IgA ili IgG antitijela podignuta protiv virusa | IgM, IgA ili IgG antitijela podignuta protiv virusa |
| Glavna svrha studije | potvrda aktivne infekcije | potvrda infekcije | potvrda infekcije |
| Mjesto izvršenja | laboratorij | laboratorij | kućno ili medicinsko mjesto |
| Cijena testa | 450-500 PLN | 100-220 PLN | 30-60 PLN |
| Vrijeme čekanja na rezultat | do 3 dana | do 3 dana | od nekoliko minuta do 1 dana |
Testovi na koronavirus - molekularno testiranje
Molekularni testovi temeljeni na lančanoj reakciji polimeraze reverzne transkripcije (RT-PCR) u stvarnom vremenu jedini su koje preporučuje Svjetska zdravstvena organizacija koji mogupotvrdite aktivnu infekciju koronavirusom.
Testovi temeljeni na RT-PCR-u u stvarnom vremenu oslanjaju se na višestruku replikaciju u nekoliko desetaka ciklusa specifičnog fragmenta genetskog materijala koronavirusa, tj. RNA. Za to se koristi enzim zvan polimeraza i specifični parovi početnica koji odgovaraju zadanom RNA fragmentu virusa. U slučaju koronavirusa SARS-CoV-2, to je npr. fragment koji kodira protein nukleokapsida (N) ili ovojnice (E).
Sljedeća faza dijagnostičkog procesa je vizualizacija umnoženog fragmenta genetskog materijala pomoću posebnih fluorescentnih boja. RT-PCR u stvarnom vremenu, zahvaljujući amplifikaciji specifičnih fragmenata virusnog genetskog materijala i korištenju fluorescentnih boja, ultraosjetljiva je metoda u usporedbi s drugim molekularnim metodama. Stoga je u stanju otkriti čak i mali broj čestica koronavirusa u testiranom biološkom materijalu.
Naravno, da bi se dobili najpouzdaniji rezultati, tijekom samog RT-PCR testa u stvarnom vremenu koristi se niz internih kontrola: pozitivna, što je RNA virusa, i negativna, što je obično voda.
Važno je znati da je ograničenje molekularnih metoda mogućnost dobivanja lažno negativnih rezultata, što može biti uzrokovano neispravnom metodom uzorkovanja ili netočnim vremenom uzorkovanja.
Obično se za molekularno testiranje u asimptomatskih osoba prikuplja materijal iz gornjih dišnih puteva, npr. nazofaringealni bris, u kojem se broj čestica koronavirusa postupno smanjuje tijekom vremena nakon infekcije.
Materijal dobiven iz donjeg respiratornog trakta, kao što je ispljuvak, alveolarno-bronhijalna tekućina (BAL) ili bronhoaspirat, je najbolji, iako se obično prikuplja od ljudi s teškim simptomima infekcije koronavirusom.
Zaključno, molekularni testovi trenutno su jedini koje Svjetska zdravstvena organizacija preporučuje za potvrdu aktivne infekcije koronavirusom SARS-CoV-2. Međutim, molekularni testovi neće odgovoriti na pitanje je li osoba već zaražena. To je moguće zahvaljujući imunološkim testovima.
Testovi na koronavirus - Imunološki test
Coronavirus imunotest mjeri prisutnost imunoloških proteina (antitijela) koje proizvodi imunološki sustav pacijenta nakon izlaganja virusu, ili prisutnost proteina (antigena) koronavirusa u krvi ili biološkom materijalu prikupljenom iz gornjih dišnih puteva.
Da biste razumjeli što imunološki testovi otkrivaju, važno je znati kako funkcionira ljudski imunološki odgovor. Nakon što koronavirus uđe u tijelo, on se aktivirastanice koje proizvode antitijela protiv njega u M klasi (IgM). Zatim, tijekom vremena, IgM antitijela se postupno zamjenjuju antitijelima G-klase (IgG). Osim toga, tijelo proizvodi antitijela klase A (IgA), koja se također mogu koristiti u dijagnostici SARS-CoV-2 koronavirusa. Riječ je o antitijelima koja su prvenstveno važna ako se mjere u izlučevinama dišnog trakta, jer ih tijelo tamo proizvodi najviše.
Vrijedi napomenuti da se vrijeme pojave pojedinačnih antitijela razlikuje za različite patogene. U slučaju infekcije koronavirusom SARS-CoV-2, ovo vrijeme je otprilike 2 tjedna. A ovo je jedno od najvećih ograničenja imunološkog istraživanja.
Od trenutka infekcije koronavirusom do stvaranja specifičnih antitijela (otprilike 2 tjedna), ona mogu biti odsutna ili preniska da bi se otkrila laboratorijskim testom. U ovoj situaciji imamo lažno negativan nalaz, odnosno osoba je zaražena koronavirusom, ali test pokazuje negativan rezultat. Takvi se rezultati mogu dobiti i kod osoba s imunodeficijencijom čiji je mehanizam proizvodnje antitijela poremećen.
U dijagnostičkim laboratorijima koriste se imunoenzimske, imunokemijske i imunobloting metode za otkrivanje IgM, IgA i IgG antitijela protiv koronavirusa ili eventualno njegovih antigena.
Izrazita prednost imunotestiranja u odnosu na molekularne metode je u tome što mogu identificirati osobe koje su prethodno bile zaražene koronavirusom SARS-CoV-2, čak i one koji su zaraženi asimptomatski.
Ipak, nedostatak imunotestiranja na koronavirus je rizik od dobivanja lažno pozitivnih rezultata, tj. osoba nije zaražena koronavirusom, ali test pokazuje pozitivan rezultat. Takva se situacija može dogoditi, na primjer, kod ljudi koji su zaraženi drugim virusima iz obitelji koronavirusa.
Ukratko, serološki testovi koji otkrivaju antitijela na koronavirus SARS-CoV-2 mogu pomoći u dijagnozi zaraženih ljudi, ali se ne koriste za potvrđivanje aktivnih slučajeva zaraze koronavirusom. Imunološki testovi mogu biti korisni za epidemiološki nadzor kako bi se identificirali ljudi koji su imali povijest infekcije koronavirusom.
Testovi na koronavirus - Brzi dijagnostički testovi
Kao odgovor na pandemiju COVID-19 i potrebu za brzom dijagnostikom zaraženih osoba i ograničenim kapacitetima dijagnostičkih laboratorija, uvedeni su testovi za tzv. brza dijagnostika koronavirusa, tj. kasetni testovi. Kasetna ispitivanja temelje se na principu sličnom principu rada testovatrudnoće, koju možete kupiti u ljekarni i koristiti imunokromatografske metode.
Da biste ih izveli, potrebna vam je mala količina krvi iz vašeg prsta. Velika prednost ovih testova je mogućnost izvođenja testa izvan laboratorija i dobivanja rezultata nakon nekoliko ili nekoliko desetaka minuta.
Ovi testovi su zapravo vrsta imunotestiranja jer ispituju prisutnost proteina (antigena) koronavirusa u uzorku uzetom iz respiratornog trakta ili prisutnost antitijela podignutih protiv virusa u krvi. Međutim, da bi takav test dao pouzdane rezultate, potrebna mu je odgovarajuća validacija, odnosno potvrda njegove vjerodostojnosti.
Loše odabrani brzi dijagnostički testovi možda neće otkriti zaražene ljude (lažno negativni rezultati) ili dati lažno pozitivne rezultate kod zdravih ljudi.
Na temelju trenutnih podataka, Svjetska zdravstvena organizacija ne preporučuje korištenje brzih dijagnostičkih testova za otkrivanje antitijela u njezi pacijenata, zbog još uvijek slabih znanstvenih dokaza. Međutim, potiče se na nastavak istraživačkog rada kako bi se utvrdila njihova prikladnost za praćenje infekcije i epidemiološke studije.
Testovi na koronavirus - kako izgleda zbirka istraživačkog materijala?
Da biste dobili pouzdan rezultat testa na koronavirus, vrlo je važno prikupiti odgovarajući biološki materijal za testiranje. Uzimanje na molekularno testiranje uključuje uzimanje brisa iz nazofarinksa ili ždrijela posebnim brisom.
Istraživanje nije baš ugodno za osobu od koje se prikuplja materijal. U nekim slučajevima, uzorci donjih dišnih puteva, kao što su sputum ili BAL tekućina, mogu biti alternativni izbor.
Prilikom uzimanja uzorka iz nazofaringealne šupljine, osoba koja uzima bris ubacuje bris duboko kroz pacijentov nos i rotira ga nekoliko puta po nekoliko sekundi. Zahvat se izvodi u obje nosnice.
S druge strane, ako se uzorak uzima iz ždrijela i sluznice nosa u isto vrijeme, bris se prvo uvlači duboko u grlo. Zatim ga osoba koja ga skuplja nekoliko puta okrene i trlja o površinu sluznice ždrijela. Zatim se bris umetne u obje nosnice. Venska krv se uzima iz pregiba lakta za imunološke pretrage.
Testovi na koronavirus - tko bi trebao napraviti test?
- osoba sa simptomima sličnim gripi, kao što su visoka temperatura, uporan kašalj, otežano disanje
- ljudi koji su putovali u područja s visokom učestalošću COVID-19
- osoba koja je imala bliski kontakt s pronađenom osobomKoronavirusna infekcija SARS-CoV-2
- osoba koja radi ili posjećuje medicinsku ustanovu u kojoj se liječe osobe zaražene koronavirusom
Testovi na koronavirus - kako protumačiti rezultate imunoloških testova?
- visoka koncentracija IgM (ili IgA) i IgG antitijela - vjerojatno aktivna koronavirusna infekcija, također asimptomatska. U tom slučaju potrebno je konzultirati liječnika radi molekularne potvrde.
- visoka koncentracija IgM (ili IgA) i niska koncentracija IgG - vjerojatno aktivna koronavirusna infekcija, također asimptomatska. U tom slučaju potrebno je konzultirati liječnika radi molekularne potvrde.
- niska koncentracija IgM (ili IgA) i visoka koncentracija IgG - vjerojatno povijest infekcije koronavirusom.
- niska koncentracija IgM (ili IgA) i koncentracija IgG - vjerojatno nema infekcije ili kontakta s koronavirusom. Međutim, negativan rezultat imunološkog testa ne isključuje aktivnu infekciju.
Testovi na koronavirus - kako protumačiti rezultate molekularnih testova?
- negativan - u testiranom materijalu nije otkriven SARS-CoV-2 koronavirus. To znači da nema zaraze koronavirusom, ali pazite, jedan negativan rezultat testa ne isključuje infekciju koronavirusom, osobito kod visoko izloženih osoba, ako se test radi brisom nazofarinksa i na početku infekcije. U tom slučaju može biti preporučljivo ponoviti test ili uzeti dublji uzorak dišnih puteva kao što je BAL.
- nedijagnostički - to znači da uzorak nije prikladan za testiranje i treba uzeti drugi uzorak
- neuvjerljivo / neuvjerljivo - to znači da je rezultat na granici analitičke osjetljivosti testa i zahtijeva drugi uzorak nakon 24-48 sati
- pozitivan - SARS-CoV-2 koronavirus je otkriven u testiranom materijalu. To znači aktivnu infekciju koronavirusom i zahtijeva hitan kontakt sa sanitarno-epidemiološkom postajom
Testovi na koronavirus - gdje se to može učiniti?
Osobe za koje se sumnja da su zaražene koronavirusom trebaju se javiti u najbližu sanitarno-epidemiološku postaju gdje će biti obaviještene gdje će moći izvršiti refundirani molekularni test na koronavirus.
Osim toga, Ministarstvo zdravlja postupno ažurira popis laboratorija u kojima se provode testovi na koronavirus: popis laboratorija za COVID.
Uz naknadu, molekularni, imunološki i kasetni testovi mogu se obaviti u komercijalnim laboratorijima.
- Kako oprati ruke?
- Antibakterijski gelovi i tekućine - štite li?protiv virusa SARS-CoV-2?