Kariotip je skup svih kromosoma koji se nalaze u jezgri svake somatske stanice koja ih ima, s brojem i strukturom specifičnim za svaku vrstu. Test kariotipa je vrsta citogenetskog testa koji može otkriti abnormalnosti u broju (kromosomske numeričke aberacije) i strukturi kromosoma (kromosomske strukturne aberacije).

Kariotipsadrži kompletan, karakterističan skup kromosoma. Kromosomi su strukture sastavljene od DNK i proteina, u svakoj stanici ljudskog tijela s jezgrom nalazi se 46 kromosoma, uključujući 22 para autosoma i 1 par heterosoma, tj. kromosoma koji određuju spol.

Test kariotipa je citogenetski test koji omogućuje otkrivanje abnormalnosti u broju (kromosomske numeričke aberacije) i strukturi kromosoma (kromosomske strukturne aberacije).

Poznavanje vašeg kariotipa posebno je važno za osobe koje dugo i bezuspješno pokušavaju imati djecu (u ovom slučaju bi to trebala učiniti oba partnera), žene koje su doživjele više puta spontane pobačaje ili one koje su rodile mrtvorođeno dijete i osobe koje boluju od bolesti genetski uzrokovanih kromosomskim aberacijama kako bi se potvrdila dijagnoza postavljena na temelju fenotipskih obilježja.

Sadržaj:

  1. Ispravan kariotip
  2. Kariotip: svrha testa
  3. Indikacije za određivanje i ispitivanje kariotipa
  4. Kariotip: materijal za istraživanje
  5. Kako se radi test kariotipa
  6. Prezentacija rezultata kariotipa
  7. Kariotip: vrijeme i cijena testa

Ispravan kariotip

Normalan ljudski kariotip sastoji se od 46 kromosoma, od kojih su 23 naslijeđena od majke (ovo je jezgra jezgre ženske gamete - jajne stanice), a 23 od oca (sadržana u muškoj spolnoj stanici jezgra - spermija).

Među skupom kromosoma postoje 22 para autosoma (odgovorni za nasljeđivanje i prijenos svih značajki osim onih vezanih uz spol) i 1 par heterosoma (odgovornih za nasljeđivanje spolno povezanih osobina).

Kariotip je opisan brojevima, koji predstavljaju ukupan broj kromosoma u stanicisomatska i velika slova X i Y koja predstavljaju spolne kromosome.

Normalni ženski kariotip je opisan kao 46, XX (dakle se sastoji od 46 kromosoma, od kojih su 2 X kromosoma kromosoma koji određuju spol), a normalni muški kariotip je opisan kao 46, XY (slično se sastoji od 46 kromosoma, a spol je određen s dva heterosoma, X i Y).

Kariotip: svrha citogenetskog testa

Citogenetski pregled i kariotipizacija se provode kako bi se provjerilo je li broj i struktura kromosoma pacijenta točan. Abnormalnosti u broju kromosoma nazivaju se kromosomske aberacije, među kojima se razlikuju sljedeće:

  • numeričke aberacije kromosoma

Poremećaji u broju kromosoma s normalnom morfologijom obično nastaju kao rezultat abnormalne diobe stanica. Razlikuje se po:

  • Poliploidne (euploidne) stanice, koje se karakteriziraju pomnoženim brojem haploidnih kromosoma (1n=23 kromosoma) tipičnih za zametne stanice, npr. triploidne stanice (3n=69 kromosoma; kariotip 69, XXY), tetraploid=92 kromosoma; kariotip 92, XXXY). Takve aberacije nisu uobičajene, a kod ljudi su obično smrtonosne
  • Aneuploidne stanice, karakterizirane povećanim ili smanjenim brojem pojedinačnih kromosoma s ispravnom strukturom. Takve aberacije mogu utjecati i na autosome i na kromosome koji određuju spol. Primjeri sindroma bolesti uzrokovanih abnormalnim brojem kromosoma u stanicama uključuju: - monosomiju - Turnerov sindrom 45, X0 (nedostaje jedan spolni kromosom) - trizomiju - Downov sindrom 47, XX, +21 ili 47, XY, +21 (dodatno kromosom u paru 21)
  • Strukturne kromosomske aberacije

To su poremećaji u strukturi kromosoma čiji je broj u somatskoj stanici točan. Najčešći su:

  • brisanje (gubitak fragmenta kraka kromosoma)
  • umnožavanje (duplikacija određenog fragmenta kromosomskog kraka)
  • umetanje (umetanje dodatnog fragmenta drugog kromosoma u kratki ili dugi krak kromosoma)
  • inverzija (180 stupnjeva dijela kraka kromosoma)
  • translokacija (prijenos dijela kraka kromosoma na drugi kromosom)
  • prstenastih kromosoma (nastalih kao rezultat rupture i ponovnog povezivanja slomljenih krajeva jednog ili više kromosoma)

Indikacije za određivanje i ispitivanje kariotipa

Citogenetski testovi i kariotipizacija provode se i kod odraslih i kod parova koji pokušavajupotomstvo, trudnice i djeca. Postoje mnoge indikacije za takvu dijagnostiku, posebno:

  • Reproduktivni neuspjeh

- neplodnost para (definirana kao izostanak trudnoće unatoč redovitom spolnom odnosu 3-4 puta tjedno u razdoblju od najmanje 1 godine, bez upotrebe bilo kojeg oblika kontracepcije) - ponavljajući pobačaji i poteškoće u održavanje trudnoće - mrtvorođenost - mrtvorođeno dijete s genetski uvjetovanom bolešću vezanom uz pojavu abnormalnosti u broju ili strukturi kromosoma - ispitivanje kariotipa partnera koji se žele podvrgnuti vantjelesnoj oplodnji

  • Genetska prenatalna dijagnoza je indicirana u slučaju

- napredna dob majke (žene starije od 35 godina) u vrijeme trudnoće - abnormalnosti u broju ili strukturi kromosoma kod roditelja djeteta ili braće i sestara - abnormalni rezultati prenatalnih testova temeljenih na neinvazivnim tehnikama fetusa snimanje ultrazvukom, što može ukazivati ​​na povećan rizik od kromosomskih aberacija u fetusa (povećana nuhalna translucencija, abnormalni razvoj nosne kosti)

  • Dijagnostika bolesti uzrokovanih kromosomskim aberacijama

- pacijent ima fenotipske značajke koje ukazuju na prisutnost specifičnog kromosomskog sindroma ili dismorfne značajke za potvrdu dijagnoze - prisutnost bolesti uzrokovanih kromosomskim aberacijama u užoj obitelji

  • Poremećaj spolne diferencijacije

- abnormalna struktura vanjskih genitalija zbog čega je nemoguće jasno odrediti spol novorođenčeta - nema znakova spolnog sazrijevanja

Kariotip: materijal za istraživanje

Ispitni materijal je obično:

  • periferni venski limfociti
  • Amniociti, ili oljuštene stanice fetusa koje se nalaze u amnionskoj tekućini trudnice. Njihov pregled omogućuje određivanje kariotipa fetusa. Uzimanje amnionske tekućine (amniocenteza, amniocenteza) obavlja se u specijaliziranim centrima od strane posebno osposobljenog ginekologa pod nadzorom ultrazvučne opreme. Sastoji se od uvlačenja punkcijske igle kroz majčinu trbušnu stijenku u amnionsku šupljinu i prikupljanja 15-20 ml amnionske tekućine. To je invazivni test s mnogim komplikacijama, uključujući rizik od gubitka trudnoće, mrlja iz genitalnog trakta, istjecanje amnionske tekućine, kao i intrauterinu infekciju, intrauterinu smrt ili ozljedu ubodne igle. Mogu se izvoditi između 15. i 20. tjedna trudnoće.
  • ćelijeuzorkovanje korionskih resica
  • Uzorkovanje korionskih resica obavlja se između 9. i 12. tjedna trudnoće. To je invazivni test s mnogo komplikacija, sličan testu amniocenteze.
  • Fetalne krvne stanice prikupljene tijekom kodocenteze
  • Kordocenteza, tj. punkcija pupkovine iglom za ubijanje pod strogom kontrolom ultrazvuka. Obavlja se nakon 16. tjedna trudnoće radi uzimanja krvi fetusa za pregled. To je invazivna pretraga koja se izvodi rijetko i povezana je s mogućnošću mnogih komplikacija, slično kao kod amniocenteze i uzorkovanja korionskih resica.
  • Fibroblasti dobiveni kulturom tkiva
  • Stanice izvedene iz kancerogenih tumora

Kako se radi test kariotipa

Testiranje kompletnog skupa kromosoma može se obaviti testiranjem bilo koje stanice s jezgrom u tijelu, ali najčešća upotreba su limfociti periferne krvi.

Uzorak male količine pacijentove venske periferne krvi uzima se kao standard za osnovni test krvi, kao što je kompletna krvna slika. Nije potrebna prethodna priprema pacijenta za pregled, može se obaviti u bilo koje doba dana, a pacijent ne mora biti na prazan želudac.

Za izvođenje citogenetskog testa potrebno je iz uzorka krvi dobiti limfocite inhibirane u odgovarajućoj fazi stanične diobe (mitoza) - metafazi. U tu svrhu, stanice se uzgajaju u uvjetima in vitro. Uz korištenje stimulatora stanične diobe, oni se stimuliraju na razmnožavanje.

Kada stanice dosegnu fazu metafaze mitoze, primjenjuje se posebna tvar koja inhibira proces umnožavanja u odabranoj fazi mitoze. U fazi metafaze, kromosomi su najbolje razvijeni i najlakši način za njihovu detaljnu analizu. Sljedeći korak u testu kariotipa je bojenje kromosoma kako bi se dobio karakteristični uzorak pruga za svaki kromosom.

Na temelju toga, osoba koja provodi analizu može prepoznati odgovarajuće kromosome i podijeliti ih u homologne parove. Analiza broja i strukture kromosoma moguća je korištenjem specijalizirane opreme, preciznog svjetlosnog mikroskopa i računalnog softvera.

Prezentacija rezultata kariotipa

Dobiveni i obojeni kromosomi moraju se prepoznati i podijeliti u odgovarajuće homologne parove kromosoma označene brojevima od 1 do 22. Njihova identifikacija je moguća zahvaljujući rasporedu traka u svakom paru, što je karakteristično za svaki od kromosomi. Heterosomi, ili spolni kromosomi, označeni su slovima X i Y.

Grafička distribucija 22 para kromosoma i 1 par autosoma naziva se kariogram. Za njegovu provedbu potrebno je napraviti mikrofotografiju posebno obojenih kromosoma zaustavljenih u fazi mitotičke metafaze. Dobiveni kromosomi su izrezani iz fotografija i raspoređeni u homologne parove prema njihovoj veličini, položaju centromera i uzorcima pruga.

Kariotip: vrijeme i cijena testa

Citogenetski test i razvoj kariotipa obično traju 2 do 4 tjedna jer je potrebno uspostaviti in vitro kulturu ispitivanih stanica i zaustaviti diobu stanica u odgovarajućoj fazi.

Kariotip pacijenta može se obilježiti i privatno u citogenetskom laboratoriju i nadoknaditi od strane Nacionalnog zdravstvenog fonda.

Cijena testa obavljenog u privatnim uvjetima varira oko 500 PLN, može se neznatno razlikovati ovisno o laboratoriju u kojem se izvodi.

Kategorija:

Pregledi za trudnice