Antinuklearna antitijela dio su složenog dijagnostičkog procesa za sistemske bolesti vezivnog tkiva. Složen mehanizam stvaranja antinuklearnih protutijela otežava interpretaciju njihovih rezultata, a prisutnost ili odsutnost pojedinačnih antitijela ne ukazuje uvijek na bolest. Koje su vrste antinuklearnih antitijela? Kada treba izvršiti test?

Sadržaj:

  1. Antinuklearna antitijela - vrste
  2. Antinuklearna antitijela - stvaranje i mehanizam djelovanja
  3. Antinuklearna antitijela - indikacije za test
  4. Antinuklearna antitijela - o čemu je istraživanje?
  5. Antinuklearna antitijela - kako protumačiti rezultat?

Antinuklearna antitijela( ANA , antinuklearna antitijela) su autoantitijela usmjerena protiv elemenata stanične jezgre, npr. DNA i citoplazme. Oni su jedno od najraznovrsnijih i najproučavanijih antitijela.

Antinuklearna antitijela - vrste

  • protutijela protiv nuklearnih antigena koji se mogu ekstrahirati (anti-ENA):
    • protiv DNA topoizomeraze I (anti-Scl70)
    • protiv ribonukleoproteina (anti-RNP)
    • protiv Smith antigena (anti-Sm)
    • anti-Mi2 / Mi-2
    • anti-Ro (SS-A)
    • anti-La
    • anti-Jo1
    • anti-PM-Scl
    • anti-Kn
  • protutijela protiv proteina koji stvara pore gp-2010 (anti-gp-210)
  • protutijela protiv nativne dvolančane DNK (anti-dsDNA)
  • anticentromerna antitijela (anti-ACA)

Antinuklearna antitijela - stvaranje i mehanizam djelovanja

Autoimunost je nenormalan odgovor imunološkog sustava na vlastita tkiva, što rezultira pojavom autoimunih bolesti.

Opisani su različiti mehanizmi autoimunosti, od kojih je jedan oslobađanje antigena skrivenih od imunološkog sustava, npr. kao posljedica upalnog oštećenja tkiva.

Oslobađaju se elementi koji se nalaze u staničnoj jezgri, npr. DNK, RNA, histoni, koje imunološki sustav počinje prepoznavati kao strane i proizvodi antinuklearna antitijela protiv njih.

Antinuklearna antitijela - indikacije za test

  • sumnje na bolesti vezivnog tkiva:
    • sistemski eritematozni lupus (prisutnost antitijela u 95-100% pacijenata; anti-dsDNA antitijela su specifični marker bolesti)
    • lupus izazvan lijekovima (95-100% pacijenata)
    • antifosfolipidni sindrom (40-50% pacijenata)
    • sistemska skleroza (80-95% pacijenata, posebno anti-Scl70 antitijela)
    • polimiozitis i dermatomiozitis (40-80% pacijenata, posebno anti-Jo1 i anti-Mi2 antitijela)
    • Sjögrenov sindrom (48-96% pacijenata, posebno anti-Ro i anti-La antitijela)
    • reumatoidni artritis (oko 10% pacijenata)
    • juvenilni idiopatski artritis (manje od 10% pacijenata)
    • Raynaudov sindrom (20-60% pacijenata)
    • fibromialgija (15-25% pacijenata)
    • miješane bolesti vezivnog tkiva (95-100% pacijenata)
  • procjena aktivnosti bolesti i praćenje učinkovitosti liječenja, npr. anti-dsDNA antitijela u sistemskom lupusu
  • korelacija prisutnosti antitijela s pojavom specifičnih simptoma bolesti, npr. Sjögrenov sindrom i prisutnost anti-Ro i anti-La antitijela
  • predviđanje bolesti u budućnosti

Antinuklearna antitijela - o čemu je istraživanje?

Krv uzeta iz pregiba lakta na prazan želudac koristi se za određivanje antinuklearnih antitijela.

Metode za određivanje antitijela su vrlo različite i ovise o vrsti antinuklearnog antitijela koje se testira. To su uglavnom imunološke metode kao što su:

  • ELISA
  • RIA
  • indirektna imunofluorescencija
  • metoda dvostruke imunodifuzije
  • western blot

U slučaju antinuklearnih antitijela koristi se dijagnoza u dvije faze. Prvo se provodi probirni test korištenjem metode visokoosjetljive neizravne imunofluorescencije.

Metoda neizravne imunofluorescencije sastoji se u imobilizaciji HEp-2 stanica dobivenih iz ljudskih epitelnih stanica na stakalcu mikroskopa.

Stanice ove loze imaju antigene u svojoj citoplazmi i jezgri koji vežu patološka antitijela iz krvi pacijenta.

Nakon dodavanja seruma pacijenta na stakalcu, antinuklearna antitijela se vežu sa specifičnim antigenima i vidljiva su pod mikroskopom zahvaljujući posebnim fluorescentnim markerima.

Prednost neizravne imunofluorescencije je sposobnost razlikovanja tipova antitijela na temelju vrste osvjetljenja fluorescentne boje.

Na primjer, užarena jezgra homogenog tipa znači prisutnost anti-dsDNA ili anti-ssDNA.

Pozitivan rezultat probirnog testa uvijek se mora potvrditi. U tu svrhu koriste se vrlo specifične imunološke metode, npr. western blot. Nakon otkrivanja prisutnosti i identifikacije vrste antinuklearnog antitijela, utvrđuje se njegov titar, tj. najveće razrjeđenje seruma u kojem se može otkriti prisutnost antitijela.

Antinuklearna antitijela - kako protumačiti rezultat?

Točan titar antinuklearnih antitijela trebao bi biti ispod 1:40.

Ako je test probira na antinuklearna antitijela negativan i nema kliničkih simptoma koji upućuju na sistemsku bolest vezivnog tkiva, dijagnoza se ne smije proširiti na specifična antitijela, npr. anti-dsDNA, anti-Sm.

Smatra se da su klinički značajni titri kod odraslih ≥ 1:160, a kod djece ≥ 1:40.

U slučaju pozitivnih rezultata, predlaže se tumačenje rezultata testa na sljedeći način:

  • titar 1: 40-1: 80 - granični rezultat (slabo pozitivan), u nedostatku kliničkih simptoma bolesti vezivnog tkiva, ne preporuča se ponavljanje testa ili provođenje naknadnog testa, jer rezultati kod većine ljudi se ne mijenjaju tijekom godina
  • titar 1: 160-1: 640 - srednje pozitivan rezultat, u nedostatku kliničkih simptoma bolesti vezivnog tkiva, preporuča se ponoviti test nakon 6 mjeseci
  • titar ≥ 1: 1280 - visok pozitivan rezultat, u prisutnosti kliničkih simptoma bolesti vezivnog tkiva, potrebna je daljnja specijalistička dijagnoza za dijagnosticiranje bolesti

Treba napomenuti da je serološko ispitivanje na antinuklearna antitijela dio složenog dijagnostičkog procesa, te se pozitivan rezultat uvijek mora tumačiti u kontekstu kliničke slike i prisutnosti karakterističnih simptoma bolesti.

Antinuklearna antitijela niskog titra prisutna su u 5% zdrave populacije i njihova učestalost raste s godinama.

Dodatno, njihova prisutnost se nalazi u fiziološkim i patofiziološkim stanjima u kojima antinuklearna antitijela nemaju dijagnostički značaj:

  • infekcije, npr. tuberkuloza, sifilis, malarija
  • bolesti jetre, npr. ciroza
  • bolesti pluća, npr. sarkoidoza, azbestoza
  • rak, npr. leukemija, limfom, rak dojke, melanom
  • kožne bolesti npr. psorijaza, lichen planus
  • nakon transplantacije organa, npr. transplantacije srca, transplantacije bubrega
  • upotreba lijekova, npr. antiepileptika, hidralazina, litijeve soli,
  • druge autoimune bolesti, npr. Hashimotova bolest, Addisonova bolest, dijabetes tipa I
  • trudnoća(do 20% trudnica)
Vrijedi znati…

Pojavu različitih tipova antinuklearnih antitijela karakterizira etnička varijabilnost.

Na primjer, bijelci sa sistemskom sklerozom imaju veću vjerojatnost da će imati anti-ACA antitijela, a Afroamerikanci i Afroamerikanci imaju veću vjerojatnost da će imati antitijela reaktivna na topoizomerazu.

O autoruKarolina Karabin, dr.med., molekularni biologinja, laboratorijska dijagnostičarka, Cambridge Diagnostics PolskaPo struci biolog, specijaliziran za mikrobiologiju, te laboratorijski dijagnostičar s preko 10 godina iskustva u laboratorijskom radu. Diplomirala je na Visokoj školi za molekularnu medicinu i članica Poljskog društva za humanu genetiku. Voditeljica stipendija za istraživanje u Laboratoriju za molekularnu dijagnostiku na Odjelu za hematologiju, onkologiju i unutarnje bolesti Medicinskog sveučilišta u Varšavi. Obranila je titulu doktorice medicinskih znanosti iz područja medicinske biologije na 1. Medicinskom fakultetu Medicinskog sveučilišta u Varšavi. Autor mnogih znanstvenih i popularno-znanstvenih radova iz područja laboratorijske dijagnostike, molekularne biologije i prehrane. Svakodnevno, kao specijalist iz područja laboratorijske dijagnostike, vodi odjel sadržaja u Cambridge Diagnostics Polska te surađuje s timom nutricionista u CD Dietary Clinic. Svoja praktična znanja o dijagnostici i dijetoterapiji bolesti dijeli sa specijalistima na konferencijama, treninzima te u časopisima i web stranicama. Posebno ju zanima utjecaj suvremenog načina života na molekularne procese u tijelu.

Pročitajte više od ovog autora

Kategorija:

Istraživanje