Kultura je mikrobiološki test čija je svrha otkriti i identificirati mikroorganizme u krvi, urinu, izmetu ili drugom biološkom materijalu. Inokulacija je proces u više faza i provodi se samo u opravdanim slučajevima. Provjerite koje su indikacije za kulturu i o čemu se radi.

Kulturadomikrobiološki testizveden za otkrivanje i identifikaciju patogena u uzorcima biološkog materijala.

Zbog vrste testiranih patogena razlikuju sebakteriološka kultura(bakteriološki test) imikološka kultura(mikološki test).

Zbog vrste biološkog materijala, postojikulture krvi , urina, izmeta, sjemena, sputuma ili vaginalnog iscjetka. Biološki materijal može biti i cerebrospinalna tekućina, brisevi iz grla, uha, nosa, usne sluznice, pa čak i iz konjunktivalnih vrećica očiju, iz pustula i drugih kožnih lezija, kao i iz rana, fistula ili apscesa itd.

Kultura - indikacije za test

Kultura se provodi kada se sumnja na infekciju, tj. kada pacijent razvije simptome. Na primjer, indikacije za urinokulturu bit će simptomi infekcije mokraćnog sustava kao što su bol u križima ili često i bolno mokrenje.

Zauzvrat, može se posumnjati na infekciju krvi kada se pojave groznica i zimica, ubrzano disanje i otkucaji srca, pad krvnog tlaka, oslabljena svijest ili oligurija. Međutim, kultura stolice se provodi kod pacijenta koji ima proljev, grčeve u trbuhu i/ili krv ili sluz u stolici.

Uzgoj urina i vaginalnog iscjetka potrebno je provesti u trudnica - čak i u odsutnosti simptoma infekcije - kako bi se isključila prisutnost mikroorganizama koji mogu predstavljati prijetnju bebi.

Uzgoj - prikupljanje biološkog materijala

Prvo morate pravilno prikupiti uzorak biološkog materijala. Za hemokulture moraju se uzeti najmanje dva uzorka krvi iz dvije različite vene, u dvije epruvete koje sadrže dvije vrste medija za kulturu (sposobne detektirati i aerobne i anaerobne bakterije).

Zauzvrat, biološki materijal iz vagine se prikuplja posebnim brisom - jedan bris se uzima izatrij vagine i drugi oko anusa. Zatim se brisevi također stavljaju na posebnu podlogu (tzv. transportnu podlogu). S druge strane, urinokultura se radi na prvom uzorku, urinu nakon noći (tada je broj bakterija najveći), koji se skuplja u sterilnu posudu pomoću tzv. srednji tok.

Važno

Obavijestite svog liječnika o svim lijekovima koje uzimate (osobito o antibioticima i lijekovima koji utječu na zgrušavanje krvi), zdravstvenim stanjima i mogućim nositeljima patogena koji se prenose krvlju (npr. HBV, HCV, HIV) prije inokulacije.

Uzgoj - što je test?

FAZA 1 - SIJEVA

Prva faza je zasijavanje biološkog materijala, odnosno nanošenje uzorka materijala na tzv. medij kulture (mikrobiološki). To je mješavina pažljivo odabranih hranjivih tvari koje omogućuju rast i razmnožavanje mikroorganizama. Krvlju obogaćeni mediji za rast najčešće se koriste jer pružaju optimalne uvjete za rast većine vrsta patogena.

Cijepljenje se može obaviti na više načina: na tekući medij, na agar kos, ali se najčešće izvodi na Petrijevim zdjelicama (to je laboratorijska posuda, cilindrično postolje sa širokim ravnim dnom) , tj. komadić ispitanog materijala rasporedi se cik-cak ili radijalno po cijeloj površini podloge ili se podijeli na sektore i materijal se rasporedi po njima.

inokulacija se obično obavlja u laminarnoj komori, što omogućuje održavanje aseptičnih uvjeta. Komora štiti od ulaska bakterija ili spora gljivica, koje neprestano lebde u zraku izvan komore.

To je slučaj, na primjer, u slučaju urinokulture. U slučaju hemokulture, ovaj korak se izostavlja jer se medij unosi u sterilne boce ili epruvete u koje se krv izravno prikuplja. Slično, u slučaju briseva koji se stavljaju na poseban medij odmah nakon sakupljanja i odmah su namijenjeni za uzgoj.

2. FAZA - UZGOJ

Nakon nanošenja uzorka na podlogu, stavlja se u inkubator, gdje temperatura odgovara temperaturi ljudskog tijela. To su uvjeti koji dovode do razmnožavanja mikroorganizama. Poticanje rasta željenih mikroorganizama također se može postići odabirom odgovarajućeg pH i oksigenacijom. Uzgoj patogena traje od 24-48 sati (neke vrste bakterija) do čak nekoliko desetaka dana (neke gljive).

KORAK 3 - IZOLACIJA

Cilj ove faze je izolirati specifičnu vrstu patogena. U slučaju izolacije mikroorganizamaizrađuje se bakterijska suspenzija određene gustoće koja će se koristiti za identifikaciju i određivanje osjetljivosti soja na lijekove.

4. KORAK - IDENTIFIKACIJA

Trenutno se za identifikaciju mikroorganizama koriste biokemijski, ručni ili automatski testovi. Primjer biokemijskog testa je API test. Sastoji se od uvođenja bakterijske suspenzije u svaku od mikroepruveta uključenih u set. Sljedeća faza je uzgoj mikroorganizama na pravoj temperaturi. Biokemijske reakcije koje se odvijaju tijekom tog vremena uzrokovat će promjene boje, bilo spontano ili nakon dodavanja indikatorskog reagensa. Za čitanje se koristi šifrarnica ili poseban računalni program.

Mikrobiološka dijagnostika je dopunjena mikroskopskim uzorkom koji omogućuje promatranje stanica patogena nakon prethodnog bojenja.

KORAK 5 - ANTIBIOGRAM

Nakon dovršetka inokulacije, radi se antibiogram za procjenu osjetljivosti patogena na lijek. Mikrobiolog postavlja diskove s antibioticima određene koncentracije na odgovarajuću podlogu s nanesenom bakterijskom suspenzijom (tzv. antibiogram). Očitavanja antibiograma rade se mjerenjem veličine zona inhibicije rasta oko diskova koji sadrže antibiotik.

Na temelju rezultata mikrobiološkog pregleda i antibiograma, liječnik odlučuje o odgovarajućem liječenju.

Kategorija:

Istraživanje